Maklumat

6.8.3: Pengukuran Jisim Mikrob - Biologi

6.8.3: Pengukuran Jisim Mikrob - Biologi


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

OBJEKTIF PEMBELAJARAN

  • Ingat cara mengukur jisim mikrob

Pertumbuhan bakteria mengikut tiga fasa: fasa ketinggalan, fasa log, dan fasa pegun. Pengukuran keluk pertumbuhan bakteria eksponen dalam budaya kelompok secara tradisinya merupakan sebahagian daripada latihan semua ahli mikrobiologi; cara asas memerlukan penghitungan bakteria (pengiraan sel) secara langsung dan individu (mikroskopik, sitometri aliran), langsung dan pukal (bijisim), tidak langsung dan individu (pengiraan koloni), atau tidak langsung dan pukal (bilangan paling berkemungkinan, kekeruhan, pengambilan nutrien) kaedah. Model menyelaraskan teori dengan ukuran.

KAEDAH PENGUKURAN

Terdapat beberapa kaedah untuk mengukur jisim sel, termasuk gravimeterkaedah yang menggunakan neraca biasa untuk menimbang sampel (berat kering/ml) selepas air dikeluarkan.

Kaedah tidak langsung untuk mengira jisim sel ialah turbidimetri. Kultur sel adalah keruh: mereka menyerap sebahagian cahaya dan membiarkan selebihnya melaluinya. Semakin tinggi kepekatan sel, semakin tinggi kekeruhannya. Spektrofotometer ialah peralatan elektrik yang boleh mengukur kekeruhan dengan sangat tepat. Kultur diletakkan dalam kuvet lut sinar; kuvet diletakkan di dalam mesin dan kekeruhan diukur serta-merta. Formula matematik mudah membantu menukarkan kekeruhan yang dikesan kepada kepekatan sel. Menggunakan spektrofotometri untuk mengukur kekeruhan kultur dikenali sebagai turbidometri. Perhatikan perbezaan dalam ejaan: turbidimetri dan turbidometri bukan perkataan yang sama.

Dalam spektrofotometri, kultur biasanya tidak perlu dicairkan, walaupun di atas ketumpatan sel tertentu hasilnya kehilangan kebolehpercayaan. Daripada semua peralatan elektrik yang digunakan untuk mengira sel, spektrofotometer adalah yang paling murah dan operasinya paling cepat dan paling mudah. Ini telah menjadikan spektrofotometri kaedah pilihan untuk pengukuran cepat pertumbuhan bakteria dan aplikasi yang berkaitan. Terdapat spektrofotometer di mana beberapa kuvet boleh dimasukkan pada satu masa, mengurangkan masa kerja lebih banyak lagi. Di samping itu, terdapat spektrofotometer yang memerlukan jumlah kultur yang sangat kecil, sekurang-kurangnya 1 mikroliter. Ini, digabungkan dengan sifat stokastik kultur cecair, hanya membolehkan anggaran nombor sel.

Kaedah tambahan untuk pengukuran jisim mikrob ialah kuantifikasi sel dalam kultur dengan menyadur sel pada piring petri. Jika sel-sel diedarkan dengan cekap pada plat, boleh diandaikan secara umum bahawa setiap sel akan menimbulkan satu koloni. Koloni kemudiannya boleh dikira, dan berdasarkan isipadu kultur yang diketahui yang tersebar pada plat kepekatan sel boleh dikira.

Seperti halnya ruang pengiraan, kultur biasanya perlu dicairkan dengan banyak sebelum penyaduran; jika tidak, daripada mendapatkan koloni tunggal yang boleh dikira, apa yang dipanggil "rumput" akan terbentuk, mengakibatkan beribu-ribu koloni terletak di atas satu sama lain. Selain itu, penyaduran adalah kaedah paling perlahan: kebanyakan mikroorganisma memerlukan sekurang-kurangnya 12 jam untuk membentuk koloni yang boleh dilihat.

Perkara utama

  • Mengira berat kering sampel membolehkan seseorang mengira kiraan sel, tetapi sensitiviti terhad kepada sampel yang mengandungi lebih daripada 10E8 bakteria setiap mililiter.
  • Spektrofotometri ialah kaedah tidak langsung untuk mengira kepekatan sel dengan mengukur perubahan kekeruhan.
  • Bakteria juga boleh dikira dengan menggunakan kaedah penyaduran, iaitu berdasarkan bilangan koloni yang terbentuk dalam cawan Petri yang mengandungi media pertumbuhan tertentu.

Syarat Utama

  • spektrofotometri: Spektrofotometer biasanya digunakan untuk pengukuran ketransmisian atau pemantulan larutan. Walau bagaimanapun, ia juga boleh direka bentuk untuk mengukur resapan pada mana-mana julat cahaya tersenarai yang biasanya meliputi sekitar 200nm – 2500nm menggunakan kawalan dan penentukuran yang berbeza. [2] Dalam julat cahaya ini, penentukuran diperlukan pada mesin menggunakan piawaian yang berbeza dalam jenis bergantung pada panjang gelombang penentuan fotometri. [3]
  • sitometri aliran: Teknik yang digunakan untuk mengisih dan mengelaskan sel dengan menggunakan penanda pendarfluor pada permukaannya.
  • gravimeter: Alat yang digunakan untuk mengukur variasi tempatan dalam medan graviti


Tonton video: Unit Jisim alat penimbang (Disember 2022).